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【包邮】探針法肺炎支原體實時定量PCR試劑盒

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探針法肺炎支原體實時定量PCR試劑盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma pneumoniae


貨號規格
Mqt-pne-2020個反應
Mqt-pne-5050個反應
Mqt-pne-100100個反應

儲存:-20度,避光保存,有效期一年。避免反復凍融。

 

試劑盒特點:

1, 特異性檢測肺炎支原體,與其他生物基因組沒有交叉反應。

2, 靈敏度高,最低檢測極限低于每反應10個基因組。

3, 使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力強和熱穩定性好的特點;采用熱啟動方式,可抑制非特異性擴增,降低背景熒光。

4, 帶有陽性對照樣品(組分C),可用于檢驗試劑盒有效性。

5, 帶有dUTP和UDG酶,可降低殘留DNA的污染。


商品說明

肺炎支原體(Mycoplasma Pneumoniae)屬于最小的自我復制型生物之一,是導致支原體肺炎的人類病原體。其細胞呈細長形狀,長約1-2μm,寬約0.1-0.2μm,光學顯微鏡下無法檢測;其菌落的長度通常小于100μm,需要立體顯微鏡來觀察。肺炎支原體寄生于人類的呼吸道上皮,通過附著細胞器粘附于呼吸上皮細胞,然后與宿主細胞融合并進入細胞內,逃避宿主免疫系統的檢測,并調節細胞膜的組成以模擬宿主細胞膜。因此肺炎支原體易于產生慢性或潛伏性感染,而且因其細胞膜組成與人細胞相似,可能導致幾種器官和組織中的自身免疫反應。

肺炎支原體分布遍及全球,可引起多種癥狀,包括:肺炎、支氣管炎、上呼吸道疾病,有時并不表現出癥狀,通常與其他細菌或病毒難以區分。肺炎支原體經常在患呼吸道疾病的病人中被發現,并且還與多發性關節炎、中風、傳染性神經元炎、冠狀動脈疾病等有關。肺炎支原體是肺炎的重要致病因子,據報道,在大眾群體中占所有獲得性肺炎病例的10-30%,在封閉性群體(如住宿的學生、軍人)中則占25-71%。

肺炎支原體體外培養時生長緩慢,有時需數周的時間,因此很少使用體外培養法檢測。其他可能的檢測方法包括:免疫印跡,免疫熒光染色,血細胞吸附試驗,四唑還原,代謝抑制試驗,血清學試驗和聚合酶鏈式反應(PCR)等。由于成本低,測試時間相對較短,EIA血清學分析是最常用的肺炎支原體檢測方法,其缺點在于需要使用活組織,這種取樣方式可能會加大感染的嚴重程度。血清學方法通常特異性和靈敏度都比較低,且只能做回顧性檢測。PCR是確定肺炎支原體存在的最快速和最有效的方法,有更高的靈敏度和更強的特異性,且檢測時間短,僅需幾個小時即可獲得結果。定量PCR法與常規PCR法相比,不僅可以精確定量,而且操作更為方便,更少受環境污染的影響。

本試劑盒選擇細胞黏附素基因作為靶點,特異性識別肺炎支原體,經BLAST驗證,與其他生物基因組沒有交叉反應。本試劑盒檢測了分布范圍類似的28種細菌和6種病毒,未發現非特異信號;對49個組織樣品DNA進行檢測,發現38個陽性,與常規PCR方法檢測結果一致。

本試劑盒包含熱啟動DNA聚合酶、dNTP(以dUTP代替dTTP)、引物、探針、陽性對照品、ROX染料,和用以防止殘余DNA污染的UDG(Uracil- DNA Glycosylase,尿嘧啶-DNA-糖基酶),用戶只需準備好DNA樣品即可使用。

本試劑盒采用的DNA聚合酶源自極端嗜熱菌(Thermus thermophilus),經改造后較普通的Taq酶具有更強的抗抑制能力和熱穩定性。通過結合特異性單克隆抗體,在室溫下DNA聚合酶活性被抑制。在PCR循環的熱變性階段,抗體受熱被去除,此時DNA聚合酶活性恢復,因此獲得“熱啟動”功能。熱啟動可減少殘余DNA的污染,提高PCR擴增效率、靈敏度和目的片段產量。


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