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【包邮】支原體污染PCR檢測試劑盒

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支原體污染PCR檢測試劑盒

PCR Detection Kit for Mycoplasma Contamination

型號
規格
Myco-P-2020次反應
Myco-P-5050次反應
Myco-P-100100次反應


 保存條件:保存于-20℃,避免反復凍融。沒有反復凍融的情況下,保質期一年。


產品文檔:支原體去除實例.docx   支原體污染PCR檢測試劑盒說明書.docx



商品說明

支原體污染PCR檢測試劑盒,用于檢測細胞培養中的支原體污染,可檢測屬于柔膜菌綱(Mollicutes)的支原體、脲原體、無膽甾支原體、螺原體、蟲原體、中間原體等超過一百種,與柔膜菌綱以外的其他微生物沒有特異性反應。支原體常被用作柔膜菌綱的統稱。

支原體是一種直徑約為0.1-0.3 μm、無細胞壁的原核生物,具有變形能力,可透過常見過濾膜(0.22-0.45 μm),因此常規的無菌過濾方法不能將其去除,靶向細胞壁的抗生素也對支原體無效。支原體種類繁多,通常為寄生性或腐生性,有些種類可作為正常共生菌存在,有些種類具有致病性,還有一些種類具有細胞侵入性。

支原體污染是基礎研究和工業生產中一個很常見的問題,據報導,有5-35%的細胞株受到污染;一些實驗室由于對此不夠重視,實際上可能有高達80%以上的細胞株發生支原體污染。支原體在光學顯微鏡下不可見,對培養基的需求有限,一般不會引起培養物混濁,因此細胞被支原體污染一般難以察覺。支原體污染能消耗營養物,促進代謝積累,導致pH改變,誘導或抑制細胞因子表達,并改變培養細胞的代謝、增殖特征及形態。由于支原體污染能影響幾乎每一個細胞參數,所以很多研究都強調常規檢測正在培養的細胞,以確保觀察到的結果不被支原體污染所損害。

目前已知的支原體種類約200種,污染細胞培養物的支原體種類有20多種。其中95%的污染是由五種支原體引起:精氨酸支原體(Mycoplasma arginini),發酵支原體(Mycoplasma fermentans),豬鼻支原體(Mycoplasma hyorhinis),口腔支原體(Mycoplasma orale)和萊氏無膽甾原體(Acholeplasma laidlawii)。精氨酸支原體和萊氏無膽甾原體為牛源性,主要由牛血清帶入;豬鼻支原體主要由胰酶(通常來源于豬)帶入;發酵支原體和口腔支原體為人源性,主要由實驗操作人員帶入,人源性的支原體污染還包括唾液支原體和人型支原體。原代細胞的支原體污染占比不到1%,但是種類最多,已知有17種支原體,主要為鼠、禽和犬來源的支原體,如雞毒支原體(Mycoplasma gallisepticum)、關節炎支原體(Mycoplasma arthritidis)、肺支原體(Mycoplasma pulmonis)、犬支原體(Mycoplasma canis)等,一般是從原始的動物組織中帶入進來,因此種類比較多,并且有不確定性。歐洲藥典(EUROPEAN PHARMACOPOEIA)2.6.7指定了六種需檢測的支原體:萊氏無膽甾原體,雞毒支原體,豬鼻支原體,口腔支原體,肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae)和滑液支原體(Mycoplasma synoviae)。由上述內容可知,引起細胞污染的支原體種類較為繁雜,并且可能存在未知種類,因此使用支原體通用性PCR引物更適合檢測支原體污染的需要,可以避免使用物種特異性引物可能導致的漏檢情況。

目前美國、歐洲、日本的藥典仍然推薦體外培養法作為檢測支原體污染的金標準。培養法通過使用選擇性培養基,可以達到很強的特異性,并且有很高的靈敏度,但是其缺點在于操作比較繁瑣,且耗時較長,完成一個完整的檢測需28天之久。對于大多數實驗而言,這是一個不可承受的時間成本。PCR檢測由于其特異性強、靈敏度高,且快速的特點,成為培養法的最優替代方案,正逐漸被世界各國所接受。

本試劑盒采用支原體通用性引物,可檢測上述提及的全部支原體,最低檢測極限(LOD,100%檢出時的最低模板濃度)為反應液中10個支原體基因組,能在2到3小時內獲得可靠的結果,是一種靈敏度高、特異性強、快速的檢測支原體污染的方法,具有以下特點: ①特異性引物是針對高度保守的支原體16S rRNA序列設計的,可用于檢測非常廣泛的支原體種類,不受真核細胞或細菌DNA干擾。經本試劑盒測試的支原體菌株涵蓋了所有常見的支原體污染種類; ②靈敏度極高,最低檢測極限僅需10個拷貝的支原體基因組; ③陽性對照所用引物與支原體檢測相同,可幫助判斷假陰性現象,避免假陰性導致的誤判; ④包含PCR反應所需的所有成分,只需進行一次PCR反應,降低了交叉污染的幾率,使用方便。

由于支原體污染比較隱蔽,所以建議給細胞定期做支原體檢測,以免在未察覺的情況下給您的實驗造成影響?晒﹨⒖嫉淖龇ㄊ牵涸谛录毎M入實驗室時,以及細胞凍存入庫前,都應該做一下支原體檢測,平時每三個月常規檢測一次。

如發現支原體污染,可用我公司的支原體清除劑http://www.sjf8.com/products/18241498.html  進行清除。支原體清除劑采用雙重殺菌機制,不易耐藥。

本產品僅供科學研究使用。

 

我司可提供數十種支原體的種類鑒定和檢測,歡迎咨詢客服。

支原體名稱宿主支原體名稱宿主
肺炎支原體豬支原體
生殖支原體豬肺炎支原體
人型支原體豬滑液支原體
穿透支原體人絮狀支原體
唾液支原體豬鼻支原體
解脲脲原體
羊附紅細胞體(羊支原體)
微小脲原體無乳支原體
人類脲原體(通用)山羊支原體山羊肺炎亞種
雞毒支原體結膜支原體
滑液支原體腐敗支原體
火雞支原體火雞綿羊肺炎支原體
衣阿華支原體鳥類絲狀支原體族(通用)羊,牛
肺支原體萊氏無膽甾原體牛,羊
關節炎支原體絲狀支原體絲狀亞種
愛德華支原體Mycolasma leachii
犬支原體牛支原體
貓血支原體牛生殖道支原體
Candidatus Mycoplasma haemominutum維容氏支原體
嗜血支原體(通用)哺乳動物血液差異脲原體



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支原體清除劑,貨號:Myco-E-h,Myco-E-1,Myco-E-5,產品鏈接:http://www.sjf8.com/products/18241498.html


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